3-硝基酪氨酸檢測(cè)試劑盒操作步驟

3-硝基酪氨酸檢測(cè)試劑盒操作步驟:

1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣：在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔，在di一、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl，然后在di一、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后從di一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為180 ng/L，120 ng/L ，60 ng/L，30 ng/，15 ng/L）。

2. 加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘。

人嗜鉻蛋白A(CgA)ELISA Kit

人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤抑制蛋白(pRB)ELISA Kit

人生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌基因α/黑素瘤生長(zhǎng)刺激因子(GROα/CXCL1/MGSA)ELISA Kit

人成熟促進(jìn)因子(MPF)ELISA Kit

人去唾液酸糖蛋白受體(ASGPR)ELISA Kit

人可溶性轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(sTfR)ELISA Kit

人金屬硫蛋白(MT)ELISA Kit

人小扁豆素結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體3(AFP-L3)ELISA Kit

人小扁豆素結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體2(AFP-L2)ELISA Kit

人小扁豆素結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體1(AFP-L1)ELISA Kit

人黑色素瘤標(biāo)記物(MART/Melan-A)ELISA Kit

人高分子量細(xì)胞角蛋白(CK-HMW)ELISA Kit

人肝癌抗原(PHC)ELISA Kit

人凋亡蛋白酶激活因子1(Apaf-1)ELISA Kit

人鼻咽癌(NPC)ELISA Kit

人膀胱癌抗原(UBC)ELISA Kit

人廣譜細(xì)胞角蛋白(P-CK)ELISA Kit

人癌基因蛋白質(zhì)p190/bcr-abl ELISA Kit

人膀胱腫瘤抗原(BTA)ELISA Kit

人中期因子(MK)ELISA Kit

人BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)ELISA Kit

人B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA Kit

人腫瘤特異生長(zhǎng)因子/腫瘤相關(guān)因子(TSGF)ELISA Kit

人色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA Kit

人克拉拉細(xì)胞蛋白(CC16) ELISA Kit

人低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)ELISA Kit

人黑色素細(xì)胞抗體(MC Ab)ELISA Kit

人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)ELISA Kit

人P53(P53)ELISA Kit

人細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA Kit