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植物elisa試劑盒操作注意事項

瀏覽次數:521發布日期:2023-02-21
  植物elisa試劑盒采用雙抗體一步夾心法免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被抗體的微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成黃色。顏色的深淺和樣品中的呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。
 
  植物elisa試劑盒操作注意事項:
 
  1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
 
  2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
 
  3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
 
  4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請乘以總稀釋倍數(×n×5)。
 
  5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
 
  6.底物請避光保存。
 
  7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
 
  8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
 
  9.本試劑不同批號組分不得混用。
 
  植物elisa試劑盒結果判定:
 
  試驗有效性:陽性對照孔平均值≥1.00; 陰性對照平均值≤0.10
 
  臨界值(CUT OFF)計算:臨界值=陰性對照孔平均值+0.15
 
  陰性判定:樣品OD值< 臨界值(CUT OFF)者為甘薯病毒(SPV)陰性
 
  陽性判定:樣品OD值≥ 臨界值(CUT OFF)者為甘薯病毒(SPV)陽性
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